1 材料与方法

1.1 材 料

构树叶：野外采集，晒干后粉碎。

纤维素酶（3000 IU/g）由湖南某生化有限公司生产，主要成分是中性纤维素酶。

蛋白酶（6000 IU/g）由某物制品有限公司生产，主要成分是木瓜蛋白酶。

复合酶由河北沧州某兽药有限公司生产，主要成分是纤维素酶、蛋白酶、木聚糖酶、木质素酶和半纤维素酶等。

EM 原露由江西某生物技术有限公司生产，主要菌群是光合细菌、真菌和放线菌等。

三黄鸡120日龄，平均体质量约1.2kg。

1.2 方 法

1.2.1 发酵构树叶的制备

称取200g 构树叶12份，分4个试验组，每组3个重复。分别添加0.1% 蛋白酶、0.1% 纤维素酶、0. 2% 复合酶和0.2%EM 菌种，并加入约60% 的水将构树叶混匀，然后压实且真空密封贮存在2000mL广口瓶中，将发酵物置于37 ℃恒温箱中发酵6d。发酵后用常规方法处理和保存样品，并按照董宽虎的《饲草生产学》进行感官鉴定。

1.2.2 构树叶营养成分的测定

水分、粗蛋白、粗灰分、粗纤维、粗脂肪、钙和磷等按常规分析方法测定，每次测定重复3次，测定误差参照《饲料分析及饲料质量检测技术》介绍的方法进行。

1.2.3 代谢试验

选取120 日龄健康的24只三黄鸡，随机分6组，每组4 个重复。1 组为对照组，2 组添加5 %的构树叶粉，3 组添加5% 复合酶发酵的构树叶粉，4 组添加5% 的蛋白酶发酵的构树叶粉，5 组添加5% 的EM 原露发酵的构树叶粉，6 组添加5% 的纤维素酶发酵的构树叶粉。

1.3 统计方法

采用SPSS（13.0）软件进行统计分析，统计软件中的一般线性模型（GLM）进行单因素方差分析，以LSD 法进行平均数的多重分析，显著性水平定为P < 0.05。

2 结果与分析

2.1 发酵处理对构树叶营养成分的影响

经发酵6d 后的构树叶，外观色泽黄绿，湿度适中，酒曲香味较浓，质地柔软松散。分析其营养成分发现，经发酵处理后的构树叶粗灰分、粗脂肪、粗蛋白和游离氨基酸含量均比对照组高，粗纤维含量则有不同程度的下降。

从表2 可见：经发酵处理的构树叶粗灰分含量均有所增加，并显著高于对照组，不同处理间差异不显著；发酵处理的构树叶粗脂肪含量增加，除了纤维素酶发酵组，其余各组均显著高于对照组；经发酵处理的构树叶粗纤维含量均有不同程度的下降，但与对照组相比，差异不显著；其中，纤维素酶发酵的构树叶粗纤维含量比对照组下降10.8%，发酵处理的构树叶粗蛋白含量均显著增加，且显著高于对照组，用EM 发酵的构树叶粗蛋白含量最高，比对照组相比提高13.6% ；游离氨基酸含量以蛋白酶发酵的试验组最高，极显著高于对照组，提高95.4 %，用纤维素酶和复合酶发酵的试验组亦显著高于构树原叶，而用EM 发酵的试验组与对照组相比，差异不显著。

2.2 发酵构树叶营养成分表观消化率的比较

从表3 可见：三黄鸡对各日粮的营养成分消化利用率无差异。粗蛋白、粗纤维、粗脂肪和磷的表观消化率X-LBP-基础日粮高于对照组和其他试验组（P >0.05），钙的表观消化率略低于基础日粮组，但高于其他试验组（P >0.05）。灵山鸡对纤维素酶发酵的构树叶消化利用率较好。EM、复合酶或蛋白酶发酵处理亦能改善灵山鸡对构树叶营养物质的消化利用。

3 讨 论

3.1 不同发酵处理对构树叶营养成分的影响

构树叶是较好的蛋白质饲料，但其蛋白质结构复杂，利用率不高，尤其是家禽和单胃动物的消化道难降解，如何能有效利用构树叶资源并将其开发成新一代植物性蛋白饲料是当前急需解决的问题之一。构树叶发酵处理主要是为了改变粗纤维、粗蛋白和游离氨基酸含量。试验表明：发酵处理可部分降解构树叶粗蛋白，增加粗蛋白和游离氨基酸含量，可提高构树的利用价值。

经纤维素酶发酵的构树叶，粗纤维含量最低，复合酶次之，蛋白酶处理则对粗纤维降解作用不大。复合酶、EM 原露和蛋白酶的发酵效果不如纤维素酶，可能与酶制剂的种类和活性有关。复合酶制剂通常比单一酶制剂效果好，但并不意味着复合酶制剂中酶的种类愈多愈好。一般情况下，添加以内源性消化酶为主的复合酶作用不明显，添加以外源性酶为主的复合酶更有实际意义（邓君明，2003）。

构树叶的蛋白结构复杂，经发酵作用，游离氨基酸含量极显著增加，尤以蛋白酶的作用最明显。推测木瓜蛋白酶是一种含巯基（- SH）肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，对动植物蛋白、多肽或蛋白质有较强的水解能力，能产生更多的多肽或游离氨基酸（乙引，2000）；EM 原露是由多种微生物组成，发酵构树叶时，这些微生物可大量繁殖，不但菌体蛋白含量增加，还能分泌多种酶，从而有效提高发酵构树叶中的粗蛋白含量。

3.2 发酵构树叶蛋白和纤维的表观消化率

构树叶利用率与粗纤维含量及蛋白质结构有关。粗纤维含量高不仅影响自身的消化，对其他营养成分的消化吸收也有不利影响，表现出抗营养作用；构树叶蛋白结构复杂直接影响肠道吸收，导致单胃动物及家禽对营养物质的利用率降低。

单胃动物和家禽内源性纤维素酶不足或缺乏，则可降低纤维素消化利用率、添加纤维素酶可补充内源酶的不足，提高动物对粗纤维的利用率。同时还可改善消化道酶系组成、酶量及活性，促进小肠对营养物质及与细胞壁结合的矿物质的吸收。吕东海（2002）研究证实，家禽肠道微生物分解产生的可溶性非淀粉多糖能增加肠道食糜的黏度，导致食糜在消化道的滞留时间延长，进一步促进肠道后段微生物发酵，从而提高粗纤维的消化率。崔琰（2008）指出，纤维素及发酵产物的共同作用能刺激肠道蠕动，促进营养物质的消化和吸收。从试验结果看，经纤维素酶发酵的构树叶，纤维素和蛋白质的表观消化率最高，EM处理组次之，说明构树叶细胞壁可在纤维素酶或复合微生物作用下部分降解，从而促进肠道对非淀粉多糖的消化吸收，提高粗纤维的利用率；与此同时，构树叶细胞壁部分裂解后，有利于改善肠道消化酶对蛋白质的分解作用，增加游离氨基酸含量，提高蛋白质的表观消化率。

木瓜蛋白酶发酵虽然能增加构树叶游离氨基酸含量，但作为一种巯基蛋白酶，其对大豆蛋白以外的植物蛋白水解能力较差（陈晓春，2005），加上未经过裂解细胞壁的屏障作用，单一木瓜蛋白酶发酵的构树叶的蛋白质表观消化率明显低于纤维素酶组和EM 处理组；另外，由于构树叶本身的粗纤维含量较高，蛋白酶并不能降低日粮粗纤维含量，粗纤维的抗营养作用也可使粗蛋白表观消化率下降。

与基础日粮组相比，添加5%构树叶的LBP组粗蛋白、粗纤维、粗脂肪和干物质的表观消化率均有一定程度的不良影响。发酵处理能有效提高灵山鸡对构树叶营养物质的消化吸收。

3.3 构树叶的应用前景

我国饲料资源尤其是蛋白质饲料短缺的矛盾较为突出。构树适应性广且抗逆性强，构树叶粗蛋白含量超过20%，作为一种非常规蛋白质饲料资源有着良好的开发应用前景。

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