1）复合益生菌发酵效果分析。大量研究和应用案例表明，微生物发酵饲料具有无可比拟的优势，具体表现在：①微生物发酵能够有效去除饲料中的抗营养因子，如胰蛋白酶抑制因子、大豆球蛋白等，同时生物活性物质含量明显提升，具有代表性的有益生菌、蛋白酶和小分子肽等，最终大大提升饲料的营养价值；②提升饲料的适口性，增加动物采食量。饲料经过微生物发酵后，不容易消化的粗蛋白和大分子淀粉，通过微生物和有益菌群的分解转化，变为更加容易吸收的小分子氨基酸和维生素。饲料的适口性提升和动物采食量增加主要依据就是粗纤维的减少；③污染物含量降低，细菌疾病得到控制。发酵后的饲料更容易被动物吸收，所以粪便中的氮、磷、钙等含量降低，更进一步地降低粪便臭味，与此同时饲料中蛋白质分解为氨气的比重得以降低，减少对环境的污染。

2）发酵饲料研究。分解酶、多种微生物活菌等高效生物因子的作用分析如下。传统饲料中的纤维素、半纤维素等大分子纤维、各类木质素、木聚糖长分子链被分解为小分子，最终的目的是将高分子碳水化合物等不能被动物直接吸收的营养物质转化分解为低分子碳水化合物，提升饲料能量的利用率。此外，有机氮、无机氮等难以被动物利用的物质，在微生物活菌的作用下转化成营养成分较高的多种菌体蛋白质。现阶段，我国益生菌发酵饲料主要有固态、液态和固态表面吸附发酵3 种方式。固态发酵技术使用几乎不含游离水的固态培养基进行操作，该项技术历史悠久，在20 世纪90 年代提出的新型固态发酵技术具有能源消耗低、发酵设备结构简单、后期处理便捷等优势，得到广泛的应用。液态发酵利用液态的发酵介质进行，美国科学家提出的液态深层发酵技术是应用较为广泛的技术。与此同时，我国科研工作者研发的分离耦合液态发酵技术和生物反应器发酵技术已经取得重大攻关成果。

微生物有很多种类，其生物学特征也多不相同，但任何一种用于发酵饲料的微生物都必须在生物学和遗传学特性上保证其安全性和稳定性。因此，实际应用中必须经过严格的病理、毒理试验，充分证明其无毒、无害、无耐药性等副作用后才可以使用。目前，细菌、酵母菌、放线菌和丝状真菌中的许多菌种都已经用于饲料生产。最常用的主要有乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌、米曲霉、黑曲霉以及某些放线菌和光合细菌等。

微生物之间的相互作用较为复杂，复合菌种发酵的目的就是利用不同微生物之间的协同互补效应，发挥正组合的最佳效果。本试验选择的复合菌，目的是能够将大分子的淀粉、蛋白质和纤维素降解为容易被吸收的小分子物质。通过调研国内外学者的研究结果，同时结合我国饲料供应厂家的现实应用情况，确定乳酸菌、芽孢杆菌和酵母菌为复合发酵菌种。相比于单一菌种，复合益生菌的发酵效果得到显著提升。

1）试验方法。按黄玉米39%、小麦粉21%、菜籽粕14%和豆粕26%的比例混合发酵原料。复合益生菌发酵液主要成分是乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌。普通琼脂的配制：营养琼脂32g，加水至1L，121℃下灭菌20min。

发酵工艺具体操作流程：首先在发酵原料中接种不同比例和浓度的复合益生菌，然后加入不同量的自来水调节发酵水分，在拌匀后采样装入密封的锡箔袋，最后放入特定条件的培养箱发酵培养，按要求采样检测，流程如图1所示。

从发酵产物质地进行分析，可以看出，在发酵的初期呈现较弱的酸味，第3天为质地明显改善的时候，散发芳香味，同时颜色变为金黄色，随着发酵时间的延长，品质逐渐变差，气味由芳香转变为刺鼻的酸味，产物颜色加深。

6）复合益生菌发酵饲料工艺参数确定。饲料经过复合益生菌的发酵，难以消化的大分子物质减少，同时容易被吸收的氨基酸等小分子物质增多，在微生物发酵过程中，产生了大量的有益微生物和乳酸，饲料的可消化性得到提升，与此同时，发酵过程伴随着气体的产生和释放，这表明一部分能量被消耗，饲料中营养成分的消耗程度通过干物质回收率指标表示。干物质回收率越高，表示碳水化合物、矿物质和蛋白质的降解损失越少，发酵损失越少。但是该项指标在青储饲料中应用较多，在发酵饲料中作为评价指标的情况较少。最终，本试验确定乳酸菌数、pH值、感官评定指标和铵态氮作为主要的评价指标。

通过上述主要影响因素的分析，可以看出，在发酵温度、接种量和水分含量均较低的情况下，乳酸菌数量维持在低水平，同时pH较高，不适合作为最佳工艺参数。在5%接种量时，乳酸菌和铵态氮指标与低接种量无明显差异，但是明显优于更高接种量情况；高水分条件下，铵态氮含量增加；发酵时间对于产品品质的影响如前文所述。