Q1

布病阳性养殖场在抗体检测结果全部转阴后，多长时间可从外面引进牛羊？

牧场里引进新的牛羊之后，不要立即混群。引进之前先做一次布病检测，检测结果为阴性后最好再隔离饲养7-15天，复检结果为阴性后再混群饲养。

Q2

猪布鲁氏菌病严重吗？

猪的布病目前在我国不严重，根据农科院牧医所布病实验室监测和确诊情况分析，可以说我国目前还没有确诊到猪的布病。

Q3

布病血清检测一般做灭活处理吗？如何灭活？

一般ELISA检测不做灭活处理，补体结合试验推荐灭活。灭活操作：将待检血清以56℃，30 min 的条件做灭活处理。

Q4

布鲁氏菌竞争ELISA抗体检测试剂盒可以在动物感染多久后查出可疑或全阳性？

竞争法为初筛方法，能更早的检测出布病阳性抗体。我们开发的cELISA应该是一周之内可以检测到（但是需要调整Cut-off值）。间接ELISA应该更晚。

Q5

试剂盒能区分野毒和疫苗抗体吗？

实际上，抗体本身没有区别，我们可以根据不同亚型抗体水平产生的高低，结合群体的免疫情况做出初步的判定。要对个体动物进行判定的话也不是完全不可以，比较复杂，要综合运用多种方法。比如需要将IgM和IgG分别单独检测，必要时得选用2个不同的时间点，将IgM曲线和IgG曲线绘制出来后用2种方法进行检测，由于野毒株和疫苗株它的抗体是有交集的，如果落在交集点上我们是没法区分的，这个时候需要我们通过时间间隔实施区分。

Q6

强制免疫后的群体如何进行鉴别检测？

目前用到竞争ELISA方法，兰研生物的竞争ELISA抗体检测试剂盒就可以。当然需要评估和对Cut-off值调整后使用。

Q7

目前羊场用布病活疫苗进行免疫防疫，保护效果怎么样？有无副作用？

S2和A19对羊的免疫效果都还是可以的，A19被认为对山羊有一定的副作用。S2和A19都不可以注射免疫怀孕羊。

Q8

PCR检测结果参考意义是什么？

PCR检测主要用于对风险的分析，不作为确诊的标准，在一定的程度上可作为诊断的辅助方法。

Q9

一般感染布鲁氏菌多久后可以进行抗体检测？

一周时间即可进行抗体检测。

Q10

未来有没有试剂盒可以区分野毒和疫苗毒？

有。这个得根据疫苗来定，现在也可以做到，但非常繁琐，只局限于像我们的专业性实验室，目前无推广价值。我们期待新型疫苗能轻松改变这样的现状。

Q11

虎红平板及试管凝集较cELISA方法有哪些优势与不足？在实际应用中，是否应综合采用多种检测方法对来提高检测的准确性？

虎红平板及试管凝集的优势是操作简单，不足是准确率不高。实际上现在使用的cELISA方法也很简单，且准确率很高。在实际应用中我们需要综合多种检测方法检测来提高准确率。

Q12

在实验室或者临床采样过程中，怎么做好个人防护呢？

这很重要，当我们确定布病阳性牧场的时候，我们要务必做好呼吸道及眼鼻的防护。

Q13

牛羊布病一年免疫几次较好？以后是否逐渐检测净化？

一年最多免疫一次，以后我们会逐渐检测净化。

Q14

基层兽医如何开展检测？网上购买的检测试剂可靠吗？

基层兽医也可以用ELISA的方法来进行检测，虎红平板也可以。不管是网上还是线下采购的试剂盒，最好都应该做一下可靠性评估。

Q15

虎红检测结果大量呈阳性，竞争ELISA检测结果全是阴性，这种结果如何确诊？

有可能试剂盒存在很大的问题。理论上竞争ELISA应该比虎红检测出更多的阳性，因为虎红虽然是初筛方法，但是更接近确诊。虎红通过低PH值抑制了大部分IgM活性，本质上更接近确诊的方法。当然也不能排除虎红的质量问题，有些虎红质量不好，存在自凝现象，也有些虎红，敏感性设的太高，导致大量非特异性，即假阳性。

Q16

对于同一公司不同批次的试剂盒检测同一份样品结果的差异较大，应如何处置？

主要原因还是产品批次不稳定，质控没有设好。最好的处置方法就是不用这样的试剂盒。

Q17

什么情况下适合采用荧光偏振方法来检测布病？

荧光偏振实际上是一种确诊方法，而不是初筛的方法。荧光偏振试剂中，标记抗原虽然同时结合了血清中特异性IgM和IgG，但是由于IgM的对称性结构，实际获取的仅仅是IgG引起的偏振数据。

Q18

一般布病免疫后几个月开始检测?

两周到两个月。cELISA方法应该在两周到六周的时间。前提是试剂盒需求提前评估，且Cut-off值需要做调整。

Q19

阳性血清中有活菌吗？

一般没有。菌血症情况下可能会有。

Q20

布病疫苗一年打几次？

一年一次。

Q21

抗原检测可靠吗？

病原分离鉴定是抗原检测的方法之一，是可靠的。如果是核酸检测，就只能作为辅助诊断的方法。

Q22

抗体检测时发现复孔之间重复性差的原因有哪些？如何有效避免?

主要有两点。一是试剂盒不稳定；二是操作人员操作问题，比如第一次和第二次加样量差异。

Q23

注射疫苗后导致排菌的原因？

因疫苗免疫的刺激，导致已经存在布病感染的动物出现排菌增加的现象。

Q24

ELISA实验室污染严重怎么解决?

ELISA实验室一般不会出现污染严重的情况，但在实验操作中应尽可能做到避免污染，污染将导致在下游数据分析中出现很多问题，如孔与孔之间的高差异高背景值等，有几种方法可以防止污染：首先确保在一个干净的环境中进行操作，检测用水为去离子水或蒸馏水，加样时不同样品之间及时更换枪头，前期处理样本或加样时应小心谨慎，避免溅到或造成交叉污染；确保各试剂供应经常更新，每次加试剂时只取需要的量即可，避免将剩余试剂倒回原试剂瓶，因为这可能引入污染物。

Q25

免疫牛羊的产品是否会对人体产生危害？

一般不会对人体造成危害。只有布鲁氏菌才能感染人进而造成危害，而免疫过布病疫苗的动物血清和动物产品中只含布鲁氏菌抗体，并没有布鲁氏菌，因此免疫牛羊的产品对人体无害。

Q26

cELISA检测出具的阳性报告，是否可以作为捕杀的依据？

cELISA是初筛的方法，不能作为扑杀依据。试管凝集实验为阳性时即可作为扑杀依据。