当前的非洲猪瘟已经变成弱毒株的田间多样性,我们该如何应对?特别是中小散养猪场
从2021年10月开始,非洲猪瘟的流行又出现了一些新的特性,新特性主要表现有:
(1)从2021年10月开始,东北、华北等北方平原地区,新发生疫情的母猪场急速增多;发病猪群的临床症状轻微,检测的阳性样品Ct值较高。
(2)采用原来的净化处置方法,净化阳性场所需时间明显变长。阳性场处置转阴之后,经过15-25天,又会转阳,甚至多次反复。
(3)有的场没发现异常猪,就莫名检测到ASFV核酸阳性。有轻微临床症状的猪样本,检测发现病毒含量很高,Ct值可低至24。确诊发现是野毒!
(4)检测发现Ct值在25左右,很多猪没有症状,也没有死亡。低Ct值猪只,剔除后多天仍未见死亡。
(5)在首次检出阳性1周后,猪舍灰尘中经常检出病毒核酸。
针对以上非洲猪瘟出现新的问题,闫老师从非洲猪瘟的病原学特点、变异情况、感染方式、临床症状、检测手段等方面提出一些疑问,并从实验研究数据和田间观察到的一些数据及分析中,得出了一些结论。
新流行非瘟疑难问题及分析
1是否存在低剂量感染造成轻微症状 ,异常猪难以发现?
非洲猪瘟的典型症状必须依靠对阴性猪进行攻毒试验来观察确定,攻毒后症状包括厌食、发热、躺卧、皮肤出血/紫绀、关节肿胀、呼吸困难、腹泻/血便等。在生产和临床上,每次出现的症状会有差异。
对阴性猪的攻毒实验观察结果显示:不同攻毒剂量下,病毒血症开始出现的时间即是临床症状出现的时间节点;攻毒剂量不影响病毒血症出现的时间和临床症状出现的时间。病毒血症与发烧等临床症状同时出现。
2生产条件下“检测+清除”,是否会导致大量不间断的交叉污染?
这个疑虑从之前的“全面检测+清除”的经验来看,可以打消,因为并未造成大面积的猪群感染及规模缩减。迅速全检风险很小,不会造成大的污染。非洲猪瘟在群内传播很慢,个别猪感染后,在群内往往只感染临近猪。如果只采样检测异常猪不能完全消除传染源。在7天潜伏期内,再次检测基本可消除隐形感染猪。
补充一下个人观点,在异常场线全面采样的操作细节中,也有一些值得注意的事项。口鼻拭子个体采样,需要逐头更换工具及手套,采完一头消毒后再采下一头。避免做保定猪只采血等容易造成交叉污染的操作,可以采用尾根采血的方式。
3是否ASF病毒出现了很大变化?
ASFV全基因组长度约170-193 kbp,基因组中段为125kb的保守段,其中就有编码P72蛋白的B646L基因。P72、P54、P30蛋白均与病毒侵入细胞有关。基因组两端为多变的多基因家族(MGF),MGF区的突变、缺失是病毒毒力致弱的基础。CD2v是由EP402R决定的44个氨基酸,CD2v与宿主CD2v相似,与红细胞吸附感染细胞有关。
基于高通量基因组测定新技术,对非洲猪瘟病毒的毒株流行情况,有了新的认识。2021年10月首次检出野毒的田间自然变异株,有些毒株的毒力明显降低。存在着高毒力野毒和自然变异弱毒并存的现象。在难以处理的猪场阳性生产线,ASFV毒株存在明显的MGF段的大段缺失+多处基因突变。
根据张桂红研究室/国家ASF南方中心的接样检测数据发现,传统野毒、人为基因缺失毒株、自然缺失毒株、嵌合毒株都有检出。由于自然变异/缺失株的出现,通过传统的鉴别检测试剂盒来排除野毒或疫苗毒株、以及进行分型(I/II)的方法,已经没有意义。
同时,可以认识到:
(1)自然缺失毒力大为减弱,感染猪临床无异常;
(2)“常规的异常猪”检测手段,难以及时发现猪群已经感染。
(3)仅仅剔除异常猪不能快速及时净化。
4是否采样方法/样品不对,导致难以发现抗原阳性猪?
通过弱毒场线栏位表面环境采样与血清采样的检测结果比较发现,弱毒场线栏位表面环境检测特异性高,敏感性低(阴性相符的特异性为95%,阳性相符的敏感性为25%)。为提高弱毒检出率,采用两次全群采血间筛查,可有效判断猪只是否处于阴性状态。血样仍是最适合的检测样本。
5是否感染猪存在间歇性散毒,导致阳性猪有时成了阴性?
临床检测数据发现:(1)弱毒感染猪血清持续阳性,但鼻拭子、肛拭子和咽拭子出现间歇性排毒情况,可以说明猪只是阳性但是咽拭子检测不到。(2)同居猪的血清检出率较低,但是鼻拭子、咽拭子与攻毒猪也出现同样的病毒检出时间双峰,其原因可能是感染猪排毒时同居猪在摄入病毒。
弱毒的临床症状非常轻微,几乎所有样品中都存在间歇性排毒。单一样品、一次全检不一定能检出,因为每次全群检测时阳性猪不一定正在散毒。发现弱毒感染的场线,首次采样最好“咽拭子+血液”双来源,同时一个潜伏期内检测2次。
传统野毒与多毒力基因缺失的野毒株的感染,处置方法完全不同。发现阳性感染后,应尽快鉴定毒株类型,可大大节约检测与清除的资源,决定净化效果。
6其他国家的是否也发现弱毒株?有基因变异吗?什么特点?
其他国家也有报道发现ASFV弱毒株,在波罗的海地区的爱沙尼亚,发现的弱毒株,其5’端MGF区存在缺失,3’端存在反转。使用发现的弱毒株,攻毒12头小型猪,5头家猪,5头野猪。结果,75%的小型猪和所有家猪均在出现急性症状后,存活了。但是所有野猪17天内陆续死亡。
弱毒株攻毒后,检测口咽拭子、肛拭子qPCR阳性出现的时间晚,持续时间短。
也有研究报道,在格鲁吉亚出现了新的、低毒力的毒株,这使得被动检测发现感染猪,变得更加困难。
总结
(1)2021年下半年开始,已发现多种非洲猪瘟田间毒株的基因组中,毒力基因出现多处缺失,致病性已经变异、变弱,防控形势正在发生重大变化。不再是“高致死力野毒+人工缺失弱毒”并列,而是已经出现多种、多基因自然缺失的弱毒株,高致死力的野毒已经不再常见。
(2)各种受控试验和在我国的田间观察均发现,无论是强野毒、人工(单/双/多)缺失弱毒,还是自然大段缺失的弱毒,猪群均无法与之共存。弱毒感染猪,经过更长时间,均会出现严重的ASFV发病症状。
(3)通过“全群检测+精准清除”,均有成功净化的范例。“全群检测+精准清除”成功的关键是,确诊后24h内完成全群检测+离群。每晚一天都会付出超大代价。
(4)需尽快改进的方法:①尽早发现感染的快速方法;②快速全群检测的方法;③快速无污染将感染猪/接触猪隔离或离群的方法。
(5)中期看,有效预防、控制ASF,仍将是养猪业盈亏/存亡的不二法门
防控非瘟当前直接有效方法是中和体内的病毒,使其包裹病毒细胞,阻断非瘟病毒DNA的复制,从而在体内达到共生的环境,这时候以中草药特别是发酵中草药类形成干扰素就起到了至关重要的作用。非瘟病毒无法杀死,这也是目前非常有效的防控方法。
疑似非瘟在各地再现猪场损失大,可通过“拔牙”+中草药进行净化操作技术分享
非洲猪瘟暴发4年来,从未远去,不少养猪人中招了。甚至规模场也不例外,尤其是复养场左发发,右发发,基本不会消停。规模猪场防非瘟如此之难,我们散养户,更不要轻视。猪场不要让外人随便进来,自己也不要经常外出。生物安全要筑牢。当前以慢性非洲猪瘟为主:
慢性非洲猪瘟的临床症状
中度到重度关节肿胀,常伴随皮肤变红,凸起和坏死
中毒到重度关节肿胀,常伴随皮肤变红,凸起和坏死,紫绀
非洲猪瘟防控,首先是严格的生物安全措施,必须想到一切可能进入猪场的病毒来源,真正做到将非洲猪瘟拒之门外。其次,按中医“正”气存内,邪不可干”、“邪之所凑,其气必虚”的预防理论,就是强化猪群天然抗病能力。依据中医“君臣佐使”处方原则,其防制非瘟(包括其它感染性疾病)的中药组方可以参考:
每1000克采用黄芪100克、大青叶50克、香附50克、白术50克、枳壳50克、槟榔50克、茯苓50克、泽泻50克、水牛角50克、地黄25克、白芍50克、侧柏叶50克、丹皮50克、栀子50克、金银花100克、巴戟天50克、大黄25克、甘草50克、板蓝根25克和贯众25克原生中草药并进行超微粉粉碎而成。
正常猪的血管是鲜红的,感染非瘟病毒后耳朵上的血管会发生变化,出现下面情况要对猪进行“拔牙”具体介绍如下:
↓看耳朵血管由鲜红发展到暗红,说明已经感染
↓由暗红变得发青,说明距离发病时间很短了,大约一周
↓耳朵变厚,身上卧着红,大部分不吃料或开始减料了
↓耳朵变厚,身上卧着红,大部分不吃料或开始减料了
一、自动供料系统在规模猪场、饲喂干料的猪场的运用
未发生感染时,每吨饲料中长期添加500-1000克“御瘟汤”,并且每吨饲料中另外添加20公斤“多功能生物发酵活菌肽”,并且养殖栏舍中少使用或者不使用化学消毒剂,改为使用“高效持久生物除臭消毒剂”,前3天每天1次之后每3-7天1次,所有吃料的猪群(含母猪各阶段都可以使用)长期使用(此方案每头猪每月成本约3-6元,母猪10元左右)。
如果已经发生疑似感染首先要对不吃料、减料、耳朵血管鼓起且发暗皮肤发紫、流产、死胎、表现异常的猪要快速隔离或淘汰(不能有心软舍不得的心态,一周内都持续这样做),全场猪快速补打猪圆环病毒2型灭活疫苗(已经进行免疫的不需要补打),同时马上在每吨饲料中添加5公斤“御瘟汤”(最高可以每吨饲料中添加10公斤,效果更直观),并且每吨饲料中另外添加40公斤“多功能生物发酵活菌肽”,连续使用14-19天。在所有养殖栏舍中少使用或者不使用化学消毒剂,改为使用“高效持久生物除臭消毒剂”,前3天每天1次之后每3天1次(此方案14-19天每头猪所需成本约6-15元,母猪25元左右),恢复正常后按照未感染时操作即可。
如果猪场已经发生混合感染(同时感染非瘟、猪瘟、蓝耳等),适当增加其它药物,能够很快控制并逐渐净化下来(下同),综合下来每头猪的成本大约在15-45元。
二、在饲喂干湿料、粥料猪场上的运用(最推荐的方法)
“御瘟汤”发酵成为中草药菌水的方法:1.5-2公斤“御瘟汤”+1包500克的“99多功能饲料发酵剂”+750克~1公斤“多糖性复合菌种营养基”(或1公斤红糖+10公斤全价饲料)+100公斤清水混合在非金属容器中简单密封发酵72小时以上后使用(在半个月内使用完效果更好,且要持续密封保存,否则时间一长可能变质不能使用)。
未发生感染时,每吨饲料中添加100公斤“御瘟汤“中草药菌水(母猪、公猪各阶段均可使用,但不超量使用或者减半使用),并且将“御瘟汤“中草药菌水兑水30倍对养殖栏舍代替化学消毒剂进行消毒(前3天每天1次之后每3-7天1次)长期使用(此方案每头猪每月成本约1.5-3元,母猪6元左右,每吨饲料运用成本不高于120元)。
发生疑似感染的猪场首先要对不吃料、减料、耳朵血管鼓起且发暗皮肤发紫、流产、死胎、表现异常的猪要快速隔离或淘汰(不能有心软舍不得的心态,一周内都持续这样做),全场猪快速补打猪圆环病毒2型灭活疫苗(已经进行免疫的不需要补打),同时在每吨饲料中添加50-100公斤“御瘟汤“中草药菌水,同时每吨饲料中再添加未发酵的“御瘟汤”原药粉5公斤(最高可以每吨饲料中添加10公斤,效果更直观),连续14-19天,并且将“御瘟汤”中草药菌水兑水30倍对养殖栏舍代替化学消毒剂进行消毒(前3天每天1次之后每3-7天1次)恢复正常后按照未感染时运用方法长期使用(此14-19天每头猪所需成本约3-12元,母猪约20元)。
三、稳定下来后的日常管理
1.长期在饲料中添加发酵完成的“御瘟汤”或者饲料中添加含中草药的“多功能生物发酵活菌肽”,只要是吃料的猪都不能停止使用。母猪各阶段都可以使用但切记不要对母猪过量使用,否则可能会对少数母猪影响发情等。
2.长期每3天进行1次发酵完成的“御瘟汤”兑水30倍或者采用“高效持久生物除臭消毒剂”激活后兑水30-50倍对养殖栏舍带猪消毒。
3.不使用潲水饲料,严防收猪人投毒(将非洲猪瘟病死猪投放到你的猪场以达到让你快速低价卖猪给他的目的)。这是特别要注意的事情——防止被人投毒(就是有些收猪人将病死猪组织投到你猪场的饮水池中、料槽中,甚至通过无人机来投毒,达到低价收购你猪场猪的目的),这种投毒是强毒模式,即使采取本方案有可能会导致部分感染。点击了解→猪场防控非洲猪瘟要严防“炒猪团伙”向自己猪场投毒。
4.健全的免疫:一定要对所有猪进行当前已经有疫苗必要完整的免疫,特别是圆环、猪瘟、伪狂犬等。
5.经常除四害,这点非常重要!因为四害中的苍蝇和老鼠是导致非洲猪瘟从外到内、内部快速传播的主要媒介。饲料中每隔一段时间添加环丙氨嗪(也就是“灭蝇净”)连续使用15天,对苍蝇使用各种苍蝇药能够很快解决;老鼠可以通过使用特效鼠药特别是“追踪粉”、“追踪膏”等新型鼠药能够在短时间内将老鼠基本灭绝,每2-3个月使用1次即可。当然,如果有条件,所有养殖栏舍设立防蚊蝇网、挡鼠板那就更好。
6.猪场内不要养殖其它动物。
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