导读

    生物发酵饲料作为实现无抗饲养的关键技术之一，近年来在我国养殖行业和饲料工业得到了迅速发展。为研究发酵全价饲料（FCF）在生长猪上的应用效果，作者前期开展了为期１个月（短期）的发酵全价饲料应用试验，结果表明，短期内100％饲喂发酵全价饲料可以提高生长猪的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和饲料转化率，降低死淘率及粪便臭味物质含量，具有很好的抗生素替代效果。但是长期100％饲喂是否仍具有显著优势，是否会产生健康风险，尚未可知。目前关于发酵全价饲料的研究多采用部分添加的饲喂模式，乔艳明等用发酵饲料替代5％的育肥猪日粮，试验期16周，结果表明猪的生产性能提高，发病率降低；何如芳在断奶仔猪日粮中添加30％的发酵全价饲料，饲喂28ｄ，结果表明发酵全价饲料可以提高断奶仔猪的生产性能，改善肠道健康，提高断奶仔猪的抗病力；胡新旭等研究表明，日粮中含有20％的固态发酵全价饲料（试验期154ｄ）可提高生长育肥猪的生产性能，增强免疫力，改善肉品质，实现无抗饲养。而关于生长猪长期100％饲喂发酵全价饲料的研究鲜见报道。本研究在前期试验基础上，延长试验周期，通过对生长猪生长性能、粪便臭味物质、血清抗氧化性能及免疫性能指标的测定，揭示长期100％饲喂发酵全价饲料对生长猪健康的影响，为发酵全价饲料的科学应用提供参考。

１.１ 试验动物及分组

    试验在重庆市荣昌区重庆市畜牧科学院动物试验猪场进行。选择90头22ｋｇ左右的健康二元杂交猪（约克夏×荣昌猪），公母各半，随机分成３组，每组6个重复，每个重复5头猪，进行7ｄ预饲，随后对照组饲喂无抗基础日粮，抗生素组饲喂含0.04％杆菌肽锌（有效含量为10％）的基础日粮，发酵组饲喂经发酵处理后的基础日粮，试验期60ｄ。试验期间，猪自由采食和饮水，按猪场常规程序消毒免疫。

１.２ 日粮组成及养分含量

   基础日粮的配制参照《中国猪饲养标准2004》肉脂型生长猪营养需要量。各组日粮原料组成及日粮营养水平见表１。发酵饲料制作方法及饲料发酵前后养分含量的测定均参照刘志云等方法。

１.３ 样品采集与指标测定

     试验期间，每天记录猪的采食量。试验结束时空腹称重，记录猪末重，计算ADG、ADFI及料重比（F／G）；采集猪新鲜排泄的粪便样品，分装于50ｍＬ离心管，置于冰盒中，运回实验室后测定吲哚、3－甲基吲哚、对甲酚及挥发性脂肪酸（VFA）的含量；试验结束当天上午08∶00，每组选取6头猪，颈静脉采血8～10ｍＬ，分装于促凝管中，4℃、3000ｒ／min离心10min，分离血清，用于测定血清抗氧化指标和免疫指标。饲料发酵前后还原力、羟自由基清除力、DPPH自由基清除率的测定参考Yang等方法；总抗氧化力的测定采用FRAP法；粪便中对甲酚、吲哚、3-甲基吲哚含量的测定参考宋凡方法；VFA的测定参照龙黎明等方法；血清总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）采用分光光度法进行测定，血清免疫球蛋白Ｇ（IgG）、免疫球蛋白Ｍ（IgM）、补体３（C3）、补体４（C4）使用ELISA法测定，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

１.４ 数据处理

    数据以平均值±标准差表示。采用SPSS 19.0对饲料的抗氧化性能进行独立样本ｔ检验，对猪生长性能、血清抗氧化指标、免疫指标和粪便臭味物质进行单因素方差分析，组间差异使用Duncan氏多重比较进行显著性检验，以Ｐ＜0.05作为差异显著性判断标准。

２.１ 发酵前后全价饲料氧化还原特性的变化

     由表２可知，饲料经发酵处理后，总抗氧化能力极显著提高（Ｐ＜０.０１），还原力和羟自由基清除力有升高趋势，但差异不显著（Ｐ＞0.05），DPPH 自由基清除率无显著变化（Ｐ＞0.05）。

３.１ 发酵全价饲料对生长猪生长性能和粪便臭味物质的影响

     作者前期研究结果表明，饲喂1个月发酵全价饲料可以明显提高生长猪ADFI、ADG，降低生长猪F／G和死淘率，降低粪便臭味物质含量，具有很好的抗生素替代效果。本研究在前期饲喂30ｄ的基础上又持续进行了１个月的饲喂试验，结果显示，在试验结束时，发酵组猪第１个月所表现出的促生长、降低粪便臭味物质、替代抗生素方面的优势都消失了。

    发酵全价饲料在生长猪上的长期效应消失，分析其原因，一方面是由于试验所用的发酵饲料有机酸含量较高，pH在４.０～４.５之间，其中乳酸含量为421.67mmol／ｋｇ，长期饲喂对消化系统已发育完善的生长猪可能存在健康风险。Missotten等、Brooks报道指出，发酵饲料中乳酸等有机酸含量过多，长期饲喂会引起猪生长受阻与胃肠道疾病（肠壁变薄、易断等，进而引起胃溃疡、胃扭转等）。作者在本试验完成后持续观察，发现发酵组个别猪出现吐血现象，解剖发现猪胃部出现溃疡，肠道组织切片显示，猪十二指肠、空肠、结肠黏膜完整性受损，绒毛排列疏松无序，表明长期100０％饲喂发酵全价饲料确实引起了猪胃肠道结构性损伤，影响营养物质的消化代谢，进而引起动物生长受阻和粪便物质改变。另一方面，长期饲喂含高剂量活性益生菌的饲料，可能引发猪肠道菌群结构变化，包括菌群多样性降低、菌群的过度增长等，进而引起乳酸中毒、胆盐吸收障碍等代谢紊乱问题。Ｈｅ等研究表明，断奶仔猪（试验周期25ｄ）自由采食枯草芽孢杆菌发酵饲料会改变其肠道菌群结构，扰乱乳酸、乳清酸和非结合性胆汁酸的正常产生，提高循环系统中白介素－６的水平，增加腹泻发生率。本研究所用发酵全价饲料中乳酸菌活性为9.67lg CFU/ｇ，连续饲喂２个月，可能会引起猪肠道菌群结构失衡。但本研究未对猪肠道菌群结构多样性及菌群代谢产物进行分析，因此暂不能判定其是否为长期效应消失的因素之一，后续研究中将会进一步探索。

    另外，发酵全价饲料在储存和饲喂的过程中还存在沉降问题。Missotten等研究表明，发酵液态饲料存在较为严重的固体颗粒物沉降问题，未经有效控制，会使仔猪生长受阻，同时伴随肠道形态结构损伤。本试验所用的固态发酵饲料的水分含量约为50％，存放过程中也存在矿物质及固态颗粒物的沉降问题，推测是猪生长受阻、粪便物质变化的另一可能因素。

３.２ 发酵全价饲料对生长猪血清抗氧化和免疫性能指标的影响

    Gilbert等研究表明，微生物降解作用产生的小肽类物质可以提高饲料的抗氧化功能。王雨琼等认为饲料的抗氧化性能在一定程度上反映出发酵饲料的品质。Sharma等研究发现，饲料中的抗氧化物质可以维持动物机体的抗氧化防御机制，抵御自由基产生的氧化损伤，对动物的健康和免疫系统至关重要。本试验结果也说明固态发酵技术在提高饲料氧化还原性能方面具有积极作用，经检测，饲料发酵后的总抗氧化能力极显著提高，还原力和羟自由基清除力有升高趋势。然而，这种积极作用并未在长期饲喂后体现在动物的血清抗氧化指标上。

    本试验中，饲喂发酵全价饲料的猪血清免疫指标IgM和C4水平有所提高，这与前人的研究结果相符。Wang等报道发酵饲料中的益生菌代谢产物（如有机酸、酶、SCFAs、神经传导物质等）在动物机体免疫调节中发挥重要作用。何如芳对断奶仔猪饲喂30％的发酵饲料（试验期28ｄ）发现，仔猪血清总蛋白和IgM水平提高。Sanchez等认为饲喂活性益生菌能够影响动物机体免疫系统，调节免疫反应。